Encapsulation of Plasmid DNA into Dehydrated-Rehydrated Liposomes and Its Delivery to Cells

Rubrik: Originale

(Treffer aus pharmind, Nr. 01, Seite 56 (2000))

Sammour O

Encapsulation of Plasmid DNA into Dehydrated-Rehydrated Liposomes and Its Delivery to Cells / Sammour O
Encapsulation of Plasmid DNA into Dehydrated-Rehydrated Liposomes and Its Delivery to Cells Omima A. Sammour Department of Pharmaceutics, Faculty of Pharmacy, Zagazig University, Zagazig (Egypt) Present address: Department of Pharmaceutics, Faculty of Pharmacy, King Saud University, Riyadh (Saudi Arabia) Verkapselung von Plasmid-DNS in dehydrierte-rehydrierte Liposomen und ihre Abgabe in Zellen Die Dehydration-Rehydration(DR)-Methode wurde angewandt, um die Verkapselung von Plasmid-pBR322- DNS in Liposomen zu verbessern. Die Herstellung von Liposomen mit der DR-Methode (DVR) ergab eine mehr als dreifache DNS-Aufnahme der Liposomen gegenüber multilamellären Liposomen (MLV), die durch mechanische Dispersion von Fetten hergestellt wurden und dieselbe Fettzusammensetzung haben. Elektronenmikroskopische Aufnahmen von negativ gefärbten DRV zeigten die Bildung heterogener Populationen großer Aggregate oder geschmolzener Vesikel mit Durchmessern bis zu 250 nm. Die biologische Wirkung von Liposom-verkapselten Plasmiden wurde durch Transformationsassays bestimmt. Die Inkubation intakter Liposomen mit Plasmid-DNS und kompetenten E. coli-Zellen im Standard- Transformationsansatz ergab eine Häufigkeit Tetracyclin- und Ampicillin-resistenter Kolonien, die derjenigen entspricht, die mit freier Plasmid-DNS erreicht wird. Wichtig ist, daß diese Häufigkeit durch Zugabe von DNase I zum Inkubationsansatz nicht verändert wurde, während nach Zugabe von DNase I zum Ansatz mit freier Plasmid-DNS keine Transformation mehr stattfand. Key words Cell transformation · DNA · DNase I · Escherichia coli · Liposomes, dehydration-rehydration · Plasmids     © ECV- Editio Cantor Verlag (Germany) 2000